一、光斑貼試驗原理
基本原理是將光變應原貼敷于皮膚一段時間后,再經一定波長的光線照射,光變應原在光能作用下,使前半抗原變成半抗原,與皮膚蛋白結合形成全抗原,后者刺激機體產生抗體或細胞免疫反應。當致敏后的個體再次接觸相同致敏因子或有交叉過敏的物質時,機體產生一系列變態(tài)反應,出現(xiàn)肉眼可見的紅斑、丘疹、水皰等反應,從而判斷皮膚對光變應原的光反應性。主要用于光變應性接觸性皮炎的病因診斷,確定引起該反應的光變應原。
同斑貼試驗一樣,光斑貼試驗也屬于皮膚激發(fā)試驗,同樣可以誘發(fā)出刺激性皮炎,因此,如果有接觸性蕁麻疹甚至全身嚴重過敏反應的速發(fā)型接觸性反應病史的患者,不能使用可引起變態(tài)反應的光變應原。
二、適應證和禁忌證
1. 適應證:光斑貼試驗適用于臨床上所有懷疑存在接觸光變應原引起的光變應性皮膚病的檢測,包括[3]:①既往有光敏性疾病史,如慢性光線性皮炎、多形性日光疹、光線性癢疹、日光性蕁麻疹、原因不明的光敏性疾病等;②夏季曝光部位出現(xiàn)濕疹樣皮損并且日曬后加重;③任何季節(jié)在曝光部位出現(xiàn)的皮炎;④既往外用防曬霜、非甾體抗炎藥(NASID)引起的皮炎;⑤職業(yè)性光接觸性皮炎。
2. 禁忌證:①懷疑光毒性接觸性皮炎或光敏性藥疹患者;②已知對測試的變應原過敏者;③孕婦和哺乳期婦女;④由于光斑貼試驗檢測周期較長,無行為控制能力的患者或不能保證隨訪的患者不宜進行此項試驗。
三、光變應原
主要包括防曬劑、藥物、抗菌劑和香料等。近年來,環(huán)境問題及遮光劑使用增多,4-氨基苯甲酮、羥苯甲酮等紫外線吸收劑所致的PACD也相應增多,因此許多國家光斑貼變應原的成分也相應地以遮光劑的成分為主。北美接觸性皮炎研究組(NACDG)規(guī)定每兩年就要更新一次標準變應原的組成成分;意大利建議每4 ~ 5年要更新一次光變應原的組成成分及濃度 。
中國目前主要參照EMCPPTS制定的光斑貼試驗最基本變應原,包括19種紫外線吸收劑和5種非甾體抗炎藥,對照組為凡士林基質。如考慮與職業(yè)相關,還可參照GBZ21-2006職業(yè)性光接觸性皮炎中光斑貼試驗常用的光變應原。除了以上光變應原之外,有時患者還會自帶物品進行光斑貼試驗,一般為防曬霜,可以直接進行敷貼;如果是肥皂、洗滌劑等有刺激性的物質則不宜直接進行試驗,可以參考斑貼試驗的方法制作變應原。
五、操作步驟
2004年歐洲光斑貼試驗專家組共識
測定患者的MED:本步驟可以省略,但臨床上懷疑光敏的患者(如慢性光線性皮炎、多形性日光疹、日光性蕁麻疹等)必須先測定MED。
第1步:敷貼光斑貼變應原:將變應原注滿聚乙烯塑料制成的IQ芯室,一般為15 μL,以保證與皮膚完全接觸;再將2份完全相同的變應原分別貼于背部兩側,避開肩胛骨和中線,避開急性滲出的皮膚,一側為照射側,一側為對照側,中間至少間隔3 ~ 5 cm。用標記筆作好標記。
第2步:變應原封閉24或48 h后去除,觀察有無單純接觸變應性反應。照射側接受UVA 5 J/cm2或更小劑量照射,對照側要避免光線照射。照射結束后,兩側均用防水鋁箔覆蓋。
第3步:照射后24、48、72 h,觀察兩側的反應,包括紅斑、丘疹、水腫、水皰,用0 ~ 4級表示反應強度。
目前在光變應原是避光1 d還是2 d后再接受照射的問題上存在爭議,我國建議封閉1 d后照射。國外有學者采用自身對照的方法比較光變應原封閉1 d或2 d后試驗結果的陽性率,發(fā)現(xiàn)封閉1 d的陽性率為52.9%,封閉2 d的陽性率為85.3%。
六、結果判讀
分別在照射后的24、48、72 h判讀試驗結果,以觀察某些變應原隨時間產生的反應,同時也需鑒別刺激反應與變態(tài)反應,具體鑒別標準同斑貼試驗。
七、注意事項
光斑貼試驗除了斑貼試驗的常規(guī)注意事項外,還應注意以下幾點:
①定期校準輻照儀,根據輻照儀的能量密度計算出相應的照射時間,以保證照射劑量的準確性;
②背部應有足夠大面積的正常皮膚進行試驗,且受試部位無炎癥、色素沉著、瘢痕等不適宜光斑貼試驗的情況;
③服用過噻嗪類、氟喹諾酮類等光敏性藥物的患者應避免試驗,可根據藥物的半衰期決定停用時間;
④皮膚病處于急性活動期應避免試驗;
⑤臨床上懷疑系統(tǒng)藥物引起的光變應性皮炎應避免試驗;
⑥簽署知情同意書;
⑦受試者在受試前2周及試驗期間不得服用糖皮質激素,前3 d及受試期間宜停用抗組胺藥。
八、并發(fā)癥及處理
同斑貼試驗
九、結果解釋
判讀上述試驗結果后,還需要分析與臨床的相關性。不同的光變應原可能產生的臨床意義并不相同,陰性結果只說明患者目前對所檢測的光變應原無接觸過敏及光接觸過敏;陽性變應原可以是現(xiàn)有皮膚病的病因或加重因素,也可能是既往接觸性皮炎的原因,但也可能與患者的皮膚病暫時無關或者與其他試驗產生了交叉反應。
光斑貼試驗是皮膚試驗中比較安全的檢測方法,通過選擇合適的光斑貼試驗試劑,可以有效地幫助患者找到致病的過敏原,還可以指導患者在今后的生活和工作中避免接觸有相同或相似分子結構及功能基團的物質,是機體預防遲發(fā)型光變態(tài)反應性皮膚病的重要措施。